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                分子细胞卓越中心构建双同源重组报告系统

                可同幸运快三稳中计划软件时在体内对三种细胞群进行标记示踪

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                  2019年1126日,国际学术期一分快3大小单双猜测刊Journal of Biological Chemistry 在线一分快3软件发表了中国平安彩票app下载安装院分子细胞平安彩票app下载安装卓Ψ 越创新中心/生物化学与细胞生物学研究彩票北京pk拾软件所周斌研究组的科研成果Triple-cell lineage tracing by a dual reporter on a single allele。该研究基于Dre-roxCre-loxP双北京pk拾官网app同源重组系统,构建了一种新的幸运快三历史开奖双同源重组报告系统,可以达到在体■内同时标记示踪三种细胞群。这一研究为新型双彩神app邀请码同源重组报告系统91彩神下载app下载的构建提供了新的思路,进一步扩充了双同源重组广东快三彩票直播报告系统库,并为发育、疾病和再生研究大发快三开奖提供了新的技术选择。

                  基于基因位点特异性重组酶系幸运快三走势图 百度统的遗传谱系示踪技术被广泛应用哪些平台有幸运快三于器官发育、组织再生→和疾病研究。目前,多种大快三平台重组酶系统被普遍使用,例如Cre-loxPFlpe-frtDre-rox系统。其中使用最普遍快3平台哪个好用的为Cre-loxP系统。Cre重组酶受组织或细胞特异性启动子驱动,当Cre识别两个同向loxP位点之后,会诱导Cre-loxP重组,并将两个loxP位点之间的转录终止序▼列切除,从而使转录终止序▂列之后的报告基因表达。由于这种切除事件发生在基因水平▲上,具有永久性和不可逆广东快三开奖结果性,因此表达Cre的细胞群及其子代大发云彩神88下载细胞(无论是否还在表达Cre)都将永久性地被报告基因蛋白所标记。

                  目前,已经有多种双同源一分快三堵大小技巧重组报告系统被构建,可多方一分快三下载网址式地对靶细胞进行标记,进行更北京赛车平台改单精确的谱系示踪研究。例如R26::FLAPRC::FelaR26NZGRC::RLTGIR1NR1R26-TLR等,可在体内同时幸运快3计划标记更精确的两种细胞群。在以中国人人快三投注平台往的双同源重组系统中,由于两种重组大发快三玩法酶识别位点的排列方式是相间排@列或嵌套排列,其两种报告基因的表达』会彼此影响,无法各自独立表达。而且它们无法在体内同时标记更多的细胞群。在器官北京pk10怎么下注发育或组织再生中,一种细胞可能有多种发育起源,例如在心脏发育中,其成北京赛车官网app下载纤维细胞、脂肪细胞、周细胞、冠状动脉内皮细胞起源于心脏快三平台登录网址心内膜细胞和心幸运快三软件下载外膜细胞。同时,一种干细胞可能会一分快三软件免费下载分化为多种细胞类型,例如小肠隐窝Lgr5+干细ζ 胞能分化为潘氏细胞、杯状细胞、肠内々分泌细胞及肠上皮细胞等各种小肠特化大发快三娱乐细胞。因此,构建一种新的北京pk拾直播视频具有在体内同时对多种细胞群进行标记能力的双同源重组系统将对发育和再生生物学研究具有重要意义。

                  为了解决这▓一问题,研究人员基于Dre-roxCre-loxP同源重组一分快三开奖记录酶系统,构建了一种新的双同源重组报告系统,称为R26-TLRRosa26-traffic light reporter)。R26-TLR的具体结易购彩票幸运快三计划构为Rosa26-CAG-rox-Stop-rox-Zsgreen-insulator-CAG-loxP-Stop-loxP-tdTomato。当发生Dre-rox重组后,ZsGreen基幸运快三下载因会表达,而发生Cre-loxP重组后tdTomato基因会表一分快三走势基本技巧达。ZsGreentdTomato的表达能够一分快三稳定计划软件受独立的重组事件调控而下载彩神11app不会相互影响。当一个细胞同时表达幸运快三全天计划DreCre重组酶时,这个细胞会同时彩神邀请码哪里找发生Dre-roxCre-loxP重○组而同时表达ZsGreentdTomato。所以这个系统可对三种细胞♀群进行同时标记示踪。研究人员进一步利用Sftpc-DreER;Scgb1a1-CreER;R26-TLR三基因型小鼠进行体内验证。Sftpc是肺脏II型肺泡上皮细胞AT2 cell)的分子一分快三怎么玩才能赢标记,Scgb1a1是支气管棒状细胞(club cell)的分子标那个快三平台稳定记。Sftpc+Scgb1a1+双阳性支气北京pk10官网开奖网址管肺泡干细胞(BASCs)位于支气一分快3全天管和肺泡交界处(BADJs),是一群彩神邀请码最新最好新发现的多潜能肺上皮干细胞。对以上三基因型一分快三怎么玩才能中小鼠进行Tamoxifen诱导后,收取肺脏组织进行免疫【荧光分析,证实了R26-TLR特异性地在体内□同时将Sftpc+ II型肺泡上皮细胞标记成ZsGreen+tdTomato绿色荧光,将Scgb1a1+ 棒状细胞标记成幸运快三app官网下载tdTomato+ZsGreen红色荧光,将Sftpc+Scgb1a1+ BASCs标记成ZsGreen+tdTomato+黄色荧光。进一步对肺脏进行损伤,发现可同时示踪这三种细胞群的在肺〗损伤修复中的不同响应情况。发现在萘(Naphthalene)诱导的支气管上皮损伤修复过程中,tdTomato+ZsGreen示踪的棒状细胞主要负责再生远离支北京赛车官网直播气管末端的棒状细胞和纤毛北京赛车规律破解细胞,而ZsGreen+tdTomato+示踪的BASCs负责再生支气管末端的棒状细胞和纤毛大发快三平台注册邀请码细胞。在博一分钟一开的快3平台app来霉素(Bleomycin)诱导的肺彩票一分快三网站泡损伤后,ZsGreen+tdTomato示踪的II型肺泡上皮细胞幸运快三实时开奖负责修复再生远离BADJ的肺大大快三平台泡上皮,而ZsGreen+tdTomato+示踪的BASCs负责再生BADJ附近区域的肺幸运快三免费精准计划泡上皮。总结来讲,R26-TLR可在体内同时标记一分一开快三平台下载三种细胞群,为发育、疾病和再生研究提供了◤新的研究工具。

                  该研究工作在∮研究员周斌的指导下,由研究生刘扩等完◥成,并得到了研究员季红斌的大力支持,同时得到中科院、国家基破解一分快三软件金委、国家科技部、上海市科大发快三全天计划委等的资助。

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                双同源重组系统R26-TLR可同时在体内对三种细胞群进行标记示踪

                打印 责任编辑:叶瑞优

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